[中国发明]
CN202410047963.0
一种胞外分泌贻贝蛋白的重组解淀粉芽孢杆菌及其构建方法与应用
著录项
申请号
CN202410047963.0
申请日
20240112
公开号
CN117904165A
公开日
20240419
申请(专利权)人
南京工业大学
当前权利人
南京工业大学
发明人
李莎
冯欣欣
王瑞
邱益彬
徐虹
地址
210009江苏省南京市鼓楼区新模范马路5号
国省代码
江苏(32)
主分类号
C12N15/75
分类号
C12N15/75
C07K14/435
C12P21/02
C12R1/07
代理机构
江苏圣典律师事务所
代理人
肖明芳
技术关键词
摘要
本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种胞外分泌贻贝蛋白的重组解淀粉芽孢杆菌及其构建方法与应用。本发明通过分子生物学手段,将贻贝蛋白基因Mgfp‑3B序列基于解淀粉芽孢杆菌密码子使用偏好全合成得到优化的基因片段,与组成型质粒pMA5连接,转化到解淀粉芽孢杆菌B.amyloliquefaciens NFΔSE中,获得重组解淀粉芽孢杆菌,实现了贻贝蛋白的胞外分泌,在7.5L发酵罐中产量达到120‑150mg/L。本发明利用重组解淀粉芽孢杆菌胞外分泌贻贝蛋白,能够有效避免胞内表达的细胞毒性,简化了后续复性的纯化操作,简化了制备工艺,为以解淀粉芽孢杆菌为底盘菌株,分泌表达重组蛋白提供了有益借鉴。
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