[中国发明]
CN201910633205.6
一种基于CRISPR-Cas9技术的氨糖合酶产生菌、构建方法及其应用
著录项
申请号
CN201910633205.6
申请日
20190712
公开号
CN110387345A
公开日
20191029
申请(专利权)人
扬州日兴生物科技股份有限公司
江南大学
当前权利人
扬州日兴生物科技股份有限公司;江南大学
发明人
史劲松
龚劲松
李晓鹏
许正宏
李会
张超
丁振中
地址
225600江苏省扬州市高邮市高邮镇工业园区同心路2号
国省代码
江苏(32)
主分类号
C12N1/21
分类号
C12N1/21
C12N15/70
C12N15/90
C12P19/26
C12R1/19
代理机构
南京申云知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人
朱进
摘要
本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9技术的氨糖合酶产生菌、构建方法及其应用,该氨糖合酶产生菌是将氨基葡萄糖乙酰化酶基因gnal和氨基葡萄糖合酶基因glms连接到载体pET‑28a上,再将重组质粒转入CRISPR‑Cas9基因编辑技术敲除E.coli BL21(DE3)基因组氨基葡萄糖代谢基因naggE和mannX得到的双基因缺失宿主菌中获得的。该重组菌应用于发酵培养,在摇瓶上可以累积氨基葡萄糖7.51g/L,乙酰氨基葡萄糖3.73g/L,总产量为11.24g/L;在5L发酵罐上可以累积氨基葡萄糖7.30g/L,乙酰氨基葡萄糖10.53g/L,总产量为17.83g/L。
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一种基于CRISPR-Cas9技术的氨糖合酶产生菌、构建方法及其应用