[中国发明]CN201910633205.6

一种基于CRISPR-Cas9技术的氨糖合酶产生菌、构建方法及其应用

著录项
摘要
本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9技术的氨糖合酶产生菌、构建方法及其应用,该氨糖合酶产生菌是将氨基葡萄糖乙酰化酶基因gnal和氨基葡萄糖合酶基因glms连接到载体pET‑28a上,再将重组质粒转入CRISPR‑Cas9基因编辑技术敲除E.coli BL21(DE3)基因组氨基葡萄糖代谢基因naggE和mannX得到的双基因缺失宿主菌中获得的。该重组菌应用于发酵培养,在摇瓶上可以累积氨基葡萄糖7.51g/L,乙酰氨基葡萄糖3.73g/L,总产量为11.24g/L;在5L发酵罐上可以累积氨基葡萄糖7.30g/L,乙酰氨基葡萄糖10.53g/L,总产量为17.83g/L。

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