[中国发明]
CN201310616260.7
一种新型特异性抗原负载诱导CTL的活化B细胞模型
著录项
申请号
CN201310616260.7
申请日
20131126
公开号
CN103789261A
公开日
20140514
申请(专利权)人
南京大学医学院附属鼓楼医院
当前权利人
南京大学医学院附属鼓楼医院
发明人
吴超
刘勇
陈广梅
赵琪
陈军浩
黄睿
黄祖瑚
地址
210008江苏省南京市中山路321号
国省代码
江苏(32)
主分类号
C12N5/0781
分类号
C12N5/0781
代理机构
南京中新达专利代理有限公司
代理人
孙鸥
朱杰
技术关键词
摘要
本发明涉及一种新型特异性抗原负载诱导CTL的活化B细胞模型。本发明分离人外周血,得人外周血单个核细胞,CD20磁珠分离其中的B细胞,将其在孵育箱内培养,去除B细胞的PBMC,B细胞培养后进行HBcAg18-27多肽负载,加入多肽量为50ug/ml,负载时间为12~18小时,抗原负载后洗涤B细胞,去除B细胞的PBMC细胞内,B细胞与T细胞比例为1:10,继续培养4天后取出所培养细胞,五聚体技术检测HBV HBcAg18-27多肽特异性CTL细胞。本发明解决了占外周血单个核细胞的比例在1%以下、扩增的效率不高,且培养时间长并且培养的费用高昂等缺陷。本发明建立了一种可靠和简单的细胞实验模型,避免了树突状细胞需要长时间培养并培养扩增效率低下的缺陷。
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